Banca de DEFESA: HENRIQUE LARSEN BRUNOW VENTURA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : HENRIQUE LARSEN BRUNOW VENTURA
DATA : 23/07/2019
HORA: 14:00
LOCAL: Imunova Análises Biológicas - Sala de Reunião 1
TÍTULO:

Insumos de teste rápido para diagnóstico de mastite bovina

PALAVRAS-CHAVES:

Anticorpos policlonais, bovinocultura de leite, controle leiteiro, sensibilidade, especificidade.

PÁGINAS: 45
RESUMO:

Leite e seus derivados são alimentos essenciais para a população mundial e sua produção pode ser afetada pela mastite, cujo diagnóstico permite direcionar o saneamento do rebanho. O diagnóstico definitivo se dá através da cultura e do isolamento das bactérias no leite. A sensibilidade diagnóstica é um ponto crítico. Os falsos negativos na cultura bacteriana prejudicam a efetividade do diagnóstico. Este método tem caráter qualitativo e, ainda que definitivo, pode ser afetado por fatores que tornam dúbios os resultados. Os testes atuais de campo também apresentam falsos negativos. É importante um método que apresente diagnóstico rápido com boa sensibilidade e especificidade, a baixo custo de produção e sem interpretações subjetivas. Propõe-se para isso um kit de anticorpos policlonais IgY extraídos da gema de ovos de aves previamente imunizadas pelos patógenos da mastite. Insumos para este teste foram elaborados após cultura a partir de leite de animais suspeitos, produção de anticorpos contra os agentes causadores e prova dos parâmetros em relação aos métodos de referência. Foram feitos cultivos bacterianos a partir de leite de fêmeas bovinas suspeitas de mastite. O gênero bacteriano isolado pela técnica microbiológica foi confirmado por sequenciamento do gene do RNA 16R. As bactérias foram inativadas com formalina e inoculadas com adjuvante oleoso em galinhas poedeiras em fase de produção. O soro das aves foi coletado e triado contra as respectivas bactérias em provas de aglutinação e IDGA e testado na prova de ELISA. Quando constatado potencial de aplicabilidade, os ovos correspondentes foram utilizados para extração de IgY e teste por ELISA de competição. No ELISA em diluição de base 10, o soro anti S. aureus apresentou reação maior que o padrão branco e que o soro pré imune, indicando sua especificidade. Os anticorpos policlonais contra S. aureus foram purificados da gema dos ovos e testados por prova de ELISA de competição em amostras de campo. Após confirmação em regressão linear à curva padrão do teste, constatou-se que os IgY anti S. aureus são insumos confiáveis a serem utilizados no desenvolvimento de um kit protótipo.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 047.057.669-38 - BRENO CASTELLO BRANCO BEIRÃO - UFPR
Interna - 1046884 - ELIZABETH SCHWEGLER
Interno - 1756086 - DIOGENES DEZEN
Externa à Instituição - Josir Laine Aparecida Veschi